细菌培养实验室是微生物实验室里面的配套实验室,细菌培养室用人工方法(使其在合适的温度,湿度,光照度,PH值,洁净度等环境下,使细菌生长繁殖,培养出来的细菌用于研究、鉴定和应用。广泛用于医药研究。
室内要求无菌操纵,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响.细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响,要求工作环境清洁,空气清新,干燥和无烟尘.细胞培养室的设计原则一般是无菌操纵区设在室内较少走动的内侧,常规操纵和封闭培养于一室,而洗刷消毒在另一室.与其他一般实验室工作的主要区别在于要求保持无菌操作,避免微生物及其他有害因素的影响。一般标准的细胞培养室应包括配液室、准备室和培养室。三室既相互连接又相对独立,各自完成培养过程中的不同操作。
细胞培养实验室的设置
细胞培养实验室应能进行六方面的工作:无菌操作、孵育、制备、清洗、消毒灭菌处理、储藏。
植物细胞培养实验室设置
1.基本实验室
1.1洗涤间
根据工作量的大小决定其大小,一般面积控制在30-50m2。在实验室的一侧设置专用的洗涤水槽,用来清洗玻璃器皿。中央实验台还应配置2个水槽,用于清洗小型玻璃器皿。如果工作量大,可以购置一台洗瓶机。准备1-2个洗液缸,专门用于洗涤对洁净度要求很高的玻璃器皿。此外还应配置落水架、干燥箱、柜子、超声波清洗器等。地面应耐湿并排水良好。
1.2培养基配制间
面积60平方米左右,配备的主要仪器设备有:冰箱、天平、微波炉、pH计、培养基分装器、药品柜、器械柜、抽气泵、电炉、各种规格的培养瓶、培养皿、移液管、烧杯、量筒、容量瓶、储藏瓶等。冰箱以体积180-200L为宜,用于储存培养基母液、激素维生素等贵重药品、彩色胶卷、及保存植物材料。天平应有不同感量。
1.3消毒间
配备实验台、高压灭菌锅、排风灭火设备、细菌过滤设备、干热消毒柜、电炉等。灭菌锅的选择应根据不同的要求选择不同型号的灭菌锅。一般实验室可选用小型的医用手提式高压灭菌锅,较大的实验室可选用立式自动控制压力和温度的灭菌锅。生产性的实验室可选用大型的卧式灭菌锅。
如果没有条件的话,可以将上述工作间合并成一个准备间,要求是设备的安装和排列要合理、房间要宽敞、明亮、透风,地面要便于清洁、防滑。
1.4无菌操作室
无菌操作室主要用于实验材料的接种操作,所以又叫接种室。通常由里外两间组成,外间是缓冲间,用于准备工作,还有防止污染的作用。缓冲间的门应该与接种室的门错开,两个门也不要同时开启,以保证无菌室不因开门和人的进出带进杂菌。
缓冲间内应该设有水槽、实验台、鞋帽架、和柜子、紫外灯。无菌操作室的内壁应当用塑钢板或瓷砖装修,工作人员进入操作间前要穿上消过毒的工作服和拖鞋。室内应配有超净工作台,紫外灯、解剖镜、各种接种器械等。
1.5培养室
为了控制培养室的温度和光照时间及其强度,培养室的房间不要窗户,但应当留一个通气窗,并安上排气扇。室内温度由空调控制,光照由日光灯控制。天花板和内墙***好用塑料钢板装修,地面用水磨石或瓷砖铺设,一般要分两间,一为光照培养室,一为暗培养室。培养室外应有一预备间或走廊。
培养室应配有培养架、转床、摇床、光照培养箱、生化培养箱、自动控时器等。日光灯一般用40W,固定在培养架的侧面或搁板的下面,每层有两支日光灯,距离在20cm,光照强度为2000-3000lx。
2.辅助实验室
2.1鉴定室
细胞学鉴定室其功能是对培养材料进行细胞学鉴定和研究。要求清洁、明亮、干燥,使各种光学仪器不受潮湿和灰尘污染。应配置各种显微镜、照相系统等。生化分析室在以培养细胞产物为主要目的的实验室中,应建立相应的分析化验实验室,以便于对培养物的有效成分随时进行取样检查。离心机、酶联免疫检测仪、天平、PCR仪等。2.2、温室用于试管苗的锻炼和移植,为试管苗提供满足生长的适宜环境条件。常用设备有:温室、弥雾装置、荫棚、移栽床、钵、盆、基质等.
2.动物细胞培养实验室设置
无菌条件:净化工作室,风淋室,传递窗,高效过滤器,洁净层流罩,生物安全柜,超净工作台,紫外灯,电热干燥箱,滤器,高压灭菌器,抗生素。
细胞生长条件:纯水蒸馏器,纯水仪,培养板,培养瓶,CO2培养箱,培养基,血清细胞检测条件:倒置显微镜,酶标仪,微孔板震荡器,高速离心机,移液器。
细胞保存条件:液氮罐实验室准备间缓冲间培养室。
实验室的要求
①和缓冲间相连,缓冲间内备消毒服装和鞋,口罩等,入内换上
②设置1—2台超净工作台
③室内空气不流通,有适当的光线,清洁,干燥
④侧部可设传递窗,用于物品传递
⑤照明用荧光灯为好,消毒用紫外线灯
⑥在室内工作时,动作应轻微准备间内设备
①大、小水槽②消毒设备③消毒后的物品和器械保藏柜④烘箱
⑤蒸馏器(包括双蒸,三重蒸馏水)⑥玻璃器皿,培养液等⑦电炉等
注意:
①配制溶液要用新鲜的纯水,配制过程避免交叉感染
②设备排列紧凑
③指定一处可暂放不污及有毒物质准备间设备
CO2培养箱:37度+/-0.5度;能调节温度和CO2浓度
消毒器:高压锅,蒸汽灭菌锅,干燥消毒箱
冰箱:4度或-20度家用冰箱,保存一般制剂;-70度保存蛋白制剂
水质纯化装置:净化水质用于清洗或配制培养液
另外:显微镜,离心机,酸度计,天平,液氮罐、真空泵等。