PCR实验室的压差设置对于防止交叉污染至关重要。通常,PCR实验室分为四个区域:试剂配制区、样品处理区、核酸扩增区、产物分析区。这些区域应保持相对独立,不能互通,且需遵循严格的单向流程,即只能从试剂配制区到样品处理区,再到核酸扩增区,最后到产物分析区。
压差设置上,一般遵循以下原则:
· 试剂配制区:设为微正压区域,通常设定为正压,如+15Pa,以防止外部空气进入造成污染。
· 样品处理区:同样设为微正压区域,但压力略低于试剂配制区,如+10Pa或+5Pa,以防止含核酸的气溶胶从试剂配制区进入。
· 核酸扩增区与产物分析区:设为微负压区域,如-5Pa至-20Pa,以防止含核酸的气溶胶扩散出去污染试剂与样品。
缓冲间的压差设置也至关重要,以确保实验室内外空气的有效隔离。常见的缓冲间压差设置方式包括:
· 所有缓冲间相对于区域房间内外,自身保持正压或负压状态。
· 缓冲间与实验区保持一致的压力梯度。